TaqMan探针法原理

1、聚合 在Taq Man探针的5'和3' 端分别连接一个荧光报告（R）染料和一个淬灭物（Q） 正向引物 探针 反向引物。

2、链置换 当探针完整时，报告染料发射的荧光被淬灭。

3、裂解 在每一次延伸循环中，DNA多聚酶将探针上的报告染料裂。

4、聚合完成 报告染料一旦与淬灭物分离即发出它特有的荧光。

Taqman 原理图解

主要特点

●高效平台：7900HT系统是为支持高通量而构建的，光学系统经优化以适用于384孔板荧光信号的激活和实时检测。

●先进的荧光检测技术：一束激光扫描并激活384个孔的每一个孔里的荧光染料，荧光信号通过光栅分光，经过分离的多色荧光同时到达CCD摄像机，实现多色荧光同时检测。

●自动进样装置：自动化装置可容纳84块384孔板，机械手臂可按一定顺序将待测样品板运送至主机内，配备的条形码阅读器（Bar code reader）可自动识别进入主机的样品板编号。

●有效的SNP检测手段：7900HT系统包括对于已知的单一核苷酸多态性（SNPS）作大规模筛选的软件。

优点

■ 高通量终点法进行snp分型时，7900HT每分钟读一块384孔PCR反应板。

■ 操作简便 只需一步PCR反应，无须进行纯化和预处理，直接上机检测。

■ 结果清晰 软件分析结果界面友好，标出了每个样本的基因型及荧光强度，非常直观。

缺点

■ 每次反应只能做一个snp位点的基因分型。

■ 适合大样本的snp检测，如果样本少成本会提高，因为探针成本较高。

■ 7900HT的高通量需要大量的PCR仪支持。